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胚胎移植

什么是胚胎移植?
       胚胎移植也被称作ET。在胚胎移植时,供体母马(未来马驹的遗传学母系)需要与公马受精并且怀孕。通常在受精后第8天把胚胎从供体子宫中取出,植入受体子宫。胚胎从供体母马体内移出时胚胎仅仅发育了7-8天,此时胚胎十分微小,供体母马也尚未出现怀孕的现象。因此供体可以在同一年内多次受精,在第二年产生更多的后代。受体母马将为之代孕,直到马驹产出并哺育到马驹约6个月,断奶为止。马驹是供体与公马的后代并且拥有其遗传学父母的全部特性。虽然马驹在受体子宫内发育11个月,并由受体哺育长大,但是不会获得它代孕母亲的任何特性。它具备亲生父母的全部潜能。



 

在2010年肯塔基州举行的世界马术大会上Phillippe Le Jeune与他的爱马Vigo d’Arsouilles摘金。
Vigo是胚胎移植繁育的后代,如今退役后成为世界最顶级的障碍赛种公马之一。


为什么马主选择胚胎移植繁育高价值马匹?
       比赛用马:参加训练及比赛(障碍赛、盛装舞步,绕桶赛、耐力赛,等等)的母马不能在怀孕的同时赢得比赛——这在怀孕后期非常困难,在哺乳期更是不可能。因此许多拥有成绩优秀母马的马主选择采用胚胎移植这一技术手段繁育马匹。给母马人工授精和从正在参加赛事的母马子宫内收集胚胎完全可行。很多表现一流的比赛用马是依旧活跃在赛场上的母马通过胚胎移植产生的后代。胚胎移植用于比赛用马的繁育的优点是比赛用马年轻并繁殖能力强。饲养这些比赛用马的后代时,马主可以在比赛用马很年轻时便判断出她们作为种母马的遗传价值。在马驹成长的过程中马主即可决定供体母马继续比赛时用还是专门用于马匹繁育,也能在供体成绩最好时将它高价售出,并且继续拥有它的后代。
       年轻母马:不应当在母马两岁大的时候人工授精并使它怀孕。这样做既不利于它的健康,又会妨碍她作为运动用马的发展。然而从两岁木马体内移出胚胎是可行的,这样一来母马在三岁时即能接受训练。
       每年获得多个胚胎:母马的怀孕期长达11个月,自然繁育条件下一匹母马一年只能生产一匹马驹。通过胚胎移植一匹繁育能力强的供体母马和种公马可以同一年生产出数匹马驹。在胚胎移植中心有很多母马每年繁育8个后代这样的例子。最多的是一匹9岁纯种阿拉伯母马,它两年的时间内总共繁育8匹马驹。正常情况下健康、高产的母马一生也生产不了18匹马驹。当然,这种例子只有在同时使用繁育能力好的供体母马和精子活力非常好的种公马时才会产生。



 

供体母马与它一年内繁育的8匹马驹。每匹马驹都是由同一母马和不同种公马繁育得来。
 

       生殖障碍母马:胚胎移植同样适用于不能持续怀孕直到马驹产出的母马。母马在生产时发生意外或者子宫、子宫颈严重损坏都会导致不能正常产出马驹。20岁以上的高龄母马也不能正常怀孕和生产,这是因为怀孕、生产、哺育马驹给它带来的应激太大。


马匹胚胎移植有哪些局限性?
       在牛胚胎移植中,每个性周期可以收集15个甚至更多的胚胎。奶牛可以通过使用药物一次获得多个胚胎,而这种方法在马匹繁育中并不实用,马的超数排卵结果是非常不可靠的,因此在木马中并不使用该技术。这就意味着在母马的一个性周期内只能得到一个胚胎,两次胚胎采集至少间隔两周。公认的母马繁育季节是从4月中旬开始到9月末(约5个月),要想在繁育期内获得8个胚胎,技术人员在受精和采集胚胎时必须非常谨慎。当供体母马或者种公马生殖力不强时这一难度会变得更大。总之,人工授精、胚胎采集、胚胎植入这些步骤是非常精细的,这要求兽医具备高超的技术和熟练地操作。要想在一年内获得多个后代,必须要拥有一个好的专家团队来保证母马身体健康、生殖力强,保证在最佳的时机完成受精、胚胎采集和胚胎植入工作。


怎样进行胚胎移植?
       供体母马:首先,供体应当具有优异的遗传性状,同时马主应当选择一匹性状与之相配的生殖能力旺盛的种公马。受体母马与公马交配或者由技术熟练地兽医人工输入公马精液。受精完成后7-8日即可采集胚胎。选择采集胚胎的时间非常重要,为了确保时机恰当,供体母马必须在受精前每天检查。通过B超检查,可以了解卵泡在卵巢中的生长情况,由此确定受精的最佳时机。受精后技术人员必须确定排卵时间,并以此判断受精的精确时间。这个时间非常重要,因为只有通过这个时间才能推算出采集胚胎的日期。理想条件下胚胎采集时间是排卵后的第7天到第8天。在胚胎采集时,胚胎十分微小,呈球状,自由飘浮在子宫中。如果采集胚胎时间太早(排卵后6天内),胚胎仍在输卵管中而没有到达子宫,因此无法被采集;如果胚胎采集时间太晚(排卵8天以后),采集到的胚胎太大而不能被移植到受体母马的子宫内。



 

排卵后6.75日采集到的胚胎。这一时期的胚胎被称作桑葚胚,由卵膜包被着大量的早期胚胎细胞构成。这时候胚胎还很小,直径约0.25毫米。

 


 

这是一个在排卵后8.5天后采集到的胚胎。这一阶段的胚胎被称作囊胚,在胚胎中央有一个充满液体的囊胚腔。
注意此时的胚胎直径超过了1毫米,卵膜已经消失。


       胚胎是用液体液从供体子宫内冲出的。
       在从供体子宫内收集到胚胎以后,应当将其转移到处于同一生理状况的受体母马子宫里。为了获得最好的结果,受体母马常在排卵后第6天移入胚胎,受体母马在这阶段移入胚胎后成活的几率最大。在胚胎移植中供受体的同期发情处理是难点之一。一名熟练地兽医能够使用激素类药物来控制母马的发情周期。大型的胚胎移植繁育中心有大量的受体母马供选用,由此选择恰当的发情周期受体母马的机会更大。

 


怎样从供体子宫里采集胚胎?
       如前文所提到的,胚胎采集在排卵后第7天到第8天的成功率最高。采集胚胎时母马处于安静站立的状态,老年马、年轻马、未生产过的马或者训练中的运动马都可以进行采集,整个采集过程中是无痛、没有任何副作用的。
       在胚胎采集过程中,母马被保定在保定栏中,整个尾部以下区域在胚胎采集准备阶段会被仔细地清洗和消毒。



 

胚胎采集前供体母马的准备。使用镇定剂后的母马站立在保定栏中,尾部被包扎好挂起,外阴部用肥皂和消毒药仔细清洗。


       母马清洗外阴后,一条无菌硅基塑胶管通过阴道伸入子宫中。这条塑胶管叫做冲胚管,在伸入子宫的一端有一个气球,气球可以使冲胚管牢固的固定在子宫中。
 



 
冲胚管有气球的一段伸入供体子宫中。注意图中兽医佩戴的无菌手套,这些措施可以在采集过程中最大可能的提供无菌环境。



       冲胚管固定好以后,受体子宫将充满温暖的冲胚液,子宫充满后就把液体排出,仔细收集到无菌的瓶子里,供稍后进行的检胚过程使用。子宫充满及排除,这一过程被称作“冲胚”,将被重复数次。冲胚结束以后冲胚管将从子宫内移除,装满冲胚液的无菌瓶被送入实验室,在实验室中冲胚液会被小心的倒入胚胎过滤器。胚胎过滤器能够将在冲胚液中的悬浮的胚胎过滤出来。


 

胚胎移植
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